在很多科学家回应无法反复韩春雨NgAgo剪切标记DNA的工作后,曾多次公开发表写信回应某种程度无法做的韩国科学家对NgAgo的更进一步研究又有了新的进展。他们在1月20日以实印本的形式发布一篇论文,称之为NgAgo可以起到于RNA。
这一结果有什么意义?其他批评DNA编辑起到的科学家也看见了NgAgo减少基因表达的起到,但当时只找到不是起到与DNA,不告诉否起到RNA或者蛋白质。而韩国科学家获得RNA是NgAgo起到的靶物。
另外,还有其他科学家在找寻起到于DNA的Ago家族的其他同源蛋白。韩春雨的研究在事实上性刺激了新的研究。他的研究如何判断?诺维信公司的不愿言明的合作是什么意思?《大自然-生物技术》接到什么新的材料、如何判断?还有待事件更进一步发展。
DNA细胞内的NgAgo究竟能无法构建基因组编辑?自河北科技大学副教授韩春雨及合作者去年5月首度在《大自然-生物技术》(NatureBiotechnology)报告NgAgo-gDNA系统有可能是具备极大潜力的基因编辑工具以来,科学界关于NgAgo否知道需要展开基因组编辑的辩论就没暂停过。1月20日,韩国的学者又报导了一篇关于NgAgo的研究。
这篇张贴在论文实印本网站BioRxiv的文章“利用NgAgo展开倚赖DNA的RNA切割成”(DNA-dependentRNAcleavagebytheNatronobacteriumgregoryiArgonaute)称之为,DNA细胞内的NgAgo蛋白切割成的是RNA,而不是DNA。韩国学者Jin-SooKim等在BioRxiv上载的文章称之为,DNA细胞内的NgAgo蛋白切割成的是RNA,而不是DNA。
NgAgo蛋白切割成的是RNA,而不是DNA?文章表明,韩国国立釜山大学的Jin-SooKim课题组通过体外生化实验,找到NgAgo具备DNA倚赖的RNA酶活性,并且他们还找到其与NgAgo融合的DNA(gODNs)序列必需与RNA偏移有序,而正义DNA(senseDNA)序列则无法引领NgAgo切割成靶RNA。也就是说,与NgAgo融合的DNA序列如果与RNA序列完全相同,则无法引领NgAgo切割成靶RNA。忽略,Jin-SooKim等人在这个体外生化体系中没找到NgAgo有切割成DNA的活性,这个结果不同于韩春雨之前公开发表在《大自然-生物技术》的NgAgo具备DNA酶活性的结论。
去年8月8日,韩春雨在向质粒分享信息库Addgene递交的详尽实验法方法中,提及的EDTA(二价阳离子螯合剂)有可能影响NgAgo活性的问题。在这篇论文中,Kim等获取了体外生化证据,但证明的是二价金属离子对于NgAgo的RNA酶活性(而非DNA酶活性)是必需的。文章作者还做到了更进一步的实验,测得了gODNs的长度和序列对NgAgo切割成RNA效率的影响。
实验指出,gODNs长度高于13个核苷酸(nt)则几乎无法细胞内NgAgo的RNA酶活性,而碱基错配不会影响NgAgo的酶活性,尤其是第5-14nt(5’-3’方向)的碱基尤为关键。这些结果与Cas9的DNA酶活性相近,但有意思的是,作者找到NgAgo可以多次循环催化剂,而Cas9不能用于一次。
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